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Plasmid 42230: pX330-U6-Chimeric_BB-CBh-hSpCas9
• Purpose:
A human codon-optimized SpCas9 and chimeric guide RNA expression plasmid.
• Gene/insert name:
humanized S. pyogenes Cas9
• Alt name:
SpCas9
• Alt name:
hSpCas9
• Insert size:
4272
• Fusion protein or tag:
3xFLAG
• Terminal:
N terminal on insert
• Vector backbone:
pUC ori vector
(Search Vector Database)
• Vector type:
Mammalian Expression, CRISPR
• Promoter:
CBh
• Cloning site 5':
AgeI
• Site destroyed during cloning:
No
• Cloning site 3':
EcoRI
• Site destroyed during cloning:
No
• 5' sequencing primer:
agggatggttggttggtggg List of Sequencing Primers
• 3' sequencing primer:
CCAATCCTCCCCCTTGCTGT
• Bacterial resistance(s)
Ampicillin
• Growth strain(s)
Stbl3
• Growth temperature (℃):
37
• High or low copy:
High Copy
• Sequence:View sequences (8)
• Map:
• Supplemental document:
pX330 annotated Genbank file (application/octet-stream)
• Principal Investigator:
Feng Zhang
• Terms and Licenses:
UBMTA
Comments:
Alternate plasmid name: pSpCas9(BB) (PX330)
For plasmid usage, please see the associated publication (Cong et al. Science. 2013, PMID: 23287718), as well as Ran et al. Nat Protoc. 2013, PMID: 24157548.
Addgene has sequenced a portion of this plasmid for verification. Full plasmid sequence is available only if provided by the depositing laboratory.
pX330-U6-Chimeric_BB-CBh-hSpCas98506 bp21271419710850677977089638056714962425435452836pBR322_originSacII (7548)FspI (7390)ORF frame 1AmpicillinAmpR_promoterpGEX_3_primerf1_originNarI (5911)NotI (5762)bGH_PA_terminatorBGH_rev_primerEcoRI (5523)PmlI (4157)EcoRV (3221)ApaI (2727)BglII (1618)NLSSV40 NLSSV40 NLSFLAGFLAGFLAGORF frame 3AgeI (1239)ORF frame 3CAG_enhancerKpnI (438)XbaI (428)LKO1_5_primerhU6_promoter
Feature Name Start End
hU6_promoter 10 242
LKO1_5_primer 172 191
CAG_enhancer 444 713
FLAG 1254 1274
FLAG 1275 1295
FLAG 1296 1319
SV40 NLS 1326 1346
SV40 NLS 1326 1349
NLS 1332 1346
BGH_rev_primer 5564 5547
bGH_PA_terminator 5550 5753
f1_origin 6001 6307
pGEX_3_primer 6575 6597
AmpR_promoter 6756 6784
Ampicillin 6826 7686
pBR322_origin 7841 8460
ORF Start End
ORF frame 3 3887 1230
ORF frame 3 1251 5522
ORF frame 1 6826 7686
Enzyme Name Cut
XbaI 428
KpnI 438
AgeI 1239
BglII 1618
ApaI 2727
EcoRV 3221
PmlI 4157
EcoRI 5523
NotI 5762
NarI 5911
FspI 7390
SacII 7548
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