ECL魯米諾化學發光試劑盒
產品簡介
ECL魯米諾化學發光試劑盒用于檢測辣根過氧化物酶(HRP)標記的蛋白檢測。在過氧化氫的存在下,辣根過氧化物酶催化發光液中的底物氧化并發光,此光可經X光-膠片感光記錄下來。
產品特點
1. 操作方便,使用前將溶液A和溶液B混合即可。
2. 靈敏度高。
3. 穩定性好。
運輸和保存條件
本試劑盒4°C運輸,溶液A和溶液B都應存儲于4°C,有效期為6個月。
操作步驟
1. 進行Western Blotting實驗,常規電泳、轉膜、孵育一抗,HRP標記二抗,洗膜,以下操作可在室溫下進行。
2. 新鮮配制發光工作液,將溶液A和溶液B按1:1比例混合,例如1 ml溶液A與1ml溶液B混合即成工作液。
3. 將漂洗過的膜用吸水紙除去膜上多余的洗滌液,但不要使膜完全干燥,并將其轉移至潔凈的保鮮膜內,蛋白面朝上,用槍頭將配制好的發光工作液均勻的涂抹在膜的表面。
4. 蛋白面朝上固定于X膠片暗盒中或成像儀中。
5. 暗房中進行曝光,可在暗房內放置紅燈,先預曝光1 min,根據顯影效果控制顯影時間,定影1 min。根據預曝光效果確定曝光時間,以便得到較好的曝光圖片。 成像儀按照儀器操作步驟,設置連續曝光時間,進行連續拍照。
6. 曝光后將定影的膠片取出,在自來水中輕輕漂洗,晾干后掃描圖片,以便保存。 成像儀連續曝光后,取最佳的曝光圖片作為最終結果。
注意事項:
1. 試劑盒應避光保存。
2. 發光工作液要現配現用,且在強光下信號容易淬滅,因此配制后應避光保存。
3. 曝光時取適量的工作液,避免多余的發光液浸濕膠片,影響曝光效果。
增強型 ECL魯米諾化學發光試劑盒
蛋白電泳