單層凍干管的開啟和菌種復蘇方法
上海生物網2016年12月16日報道
一 單層凍干管的開啟方法
（1）滴水破開法
首先用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管，然后將凍干粉甩至底部圓球位置，將凍干管的尖端（注意不是圓球端）放在火焰上加熱。然后迅速滴幾滴無菌水至加熱處，此時凍干管的尖端會自動破開。最后用鑷子輕輕敲下凍干管尖端，并將凍干管開口處在火焰上加熱滅菌一下，并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作。然后逐漸敲開凍干管，直至適當位置。（敲開位置以可以很好注入無菌水以及吸取混勻后的液體為準）
（2）首先用70%的酒精脫脂棉球擦凈凍干管，將凍干管的尖端（注意不是圓球端）放在火焰上加熱。然后將凍干粉甩至底部圓球位置。直接用大鑷子敲打尖端，敲開后將破口處在火焰上加熱滅菌一下，并且保持下面的菌種菌種活化步驟在火焰旁操作。 然后逐漸敲開凍干管，直至適當位置。（敲開位置以可以很好注入無菌水以及吸取混勻后的液體為準）
二 菌種復蘇方法
（1）菌種活化前，如要長期保藏，可將凍干管放在-20度條件下保存。
（2）此凍干菌是經凍干燥并抽真空保存的，開啟后必須一次使用完，不能剩菌粉下次使用。
（3）凍干管中大部分是用牛奶做保護劑，菌體為少數，復蘇時要全部菌懸液接種在新鮮培養基上，否則可能造成復蘇不成功。
（4）凍干粉是在凍干燥保存后處于休眠狀態，有時延滯期較長，如在說明書建議的培養時間還未長出，請繼續在相應的環境下多培養24小時或更長時間，直至菌種培養出。
（5）正常情況下，菌種是需要培養2代后才會具備穩定的活性，所以建議做2次繼代培養后才能用于您后續的實驗。
（6）打開凍干管應在專業的微生物專業人員才可操作，注意生物危害程度為三級的菌種應在生物安全柜中操作。其中標準菌種可以在超凈臺中操作，并且做好個人防護。開管時要注意做好個人面部防護，防止碎片飛入眼中。
（7）以上開管操作都應該在安全柜或超凈臺中操作，并且昨晚后所有器皿都要經滅菌后再銷毀。
